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Cryo-microscopie électronique (DMUV, partie 2)

Cryo-microscopie électronique (DMUV, partie 2)

Découvrez la cryo-microscopie électronique (CryoEM), ses similitudes et différences avec la microscopie optique, son principe, ses avantages et ses limites !

La partie 1 de Dessine-moi un virus, sur la structure des virus, est ici


Auteurs : Diane Letourneur*, Paul Clémençon*, Aurélie Bertin1

* contributeurs réguliers de la plateforme; 1 Institut Curie, 11 rue P.M.Curie, 75231 Paris cedex 05

Mots clés :

  • virologie structurale
  • structure des virus
  • CryoEM
  • Single Particle Analysis
  • Weighted Back Projection
  • Coloration négative
  • vitrification
  • prix Nobel Chimie 2017
  • Cryo-microscopie électronique

La microscopie électronique permet d’observer des objets de taille comprise entre 0,1 mm (10-4 m) et 0,5 nm (5 x 10-10 m).

Le parallèle entre microscopie optique et électronique. Ce type de microscope consiste à envoyer non pas de la lumière, mais des électrons sur un échantillon pour obtenir une image. On peut observer de très petits objets de l’ordre de l’Ångström. Les étapes sont les mêmes ! 1 On envoie un faisceau de particules qui traversent l’échantillon 2 On utilise des lentilles pour focaliser le faisceau et pour former et agrandir l’image de l’échantillon 3 On regarde l’image de l’échantillon. Les progrès en microscopie électronique ont permis d’améliorer grandement la résolution.

Deux techniques pour préparer l’échantillon : coloration négative et cryoEM. Coloration négative : afin d’augmenter le contraste entre le virus et le liquide dans lequel il se trouve, on ajoute des atomes de métaux lourds (comme l’acétate d’uranyle par exemple). Ces atomes lourds dévient fortement les faisceaux d’électrons envoyés par le microscope électronique. Ainsi, le virus apparaît en clair sur fond sombre : on parle de coloration négative.

CryoEM. Vitrification.

Acquisition de l’image du virus

Passer d’images en 2D à un modèle en 3D : Tomographie, Single Particle Analysis.

Bilan

 

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